Главная 30 Обследования 30 Способ раннего определения пола будущего ребенка

Способ раннего определения пола будущего ребенка

Способ раннего определения пола будущего ребенка

Владельцы патента RU 2317334:

Изобретение относится к области медицины, а именно к разработке способов неинвазивного определения пола будущего ребенка. У беременных женщин в период с 5 по 12 неделю беременности производят забор биологической жидкости — мочи или периферической крови, разделяют собранную жидкость на супернатант (плазму) и фракцию клеток (мочи или крови) при помощи центрифугирования. Далее из клеточной фракции элюируют внеклеточные дезоксирибонуклеиновые кислоты (внДНК), связанные с поверхностью клеток крови или мочи, выделяют внДНК из полученных элюатов и проводят выявление в них с помощью ПЦР-анализа Y специфической последовательности DAZ, при этом в качестве праймеров используют систему, состоящую из двух прямых и двух обратных праймеров:

прямой 5′-GGGAACTAATGACAAAAGAATTGAC-3′ (пр.1),

обратный 5′-AAGAAATAACTTCTGGGTGTGAATAAG-3′ (пр.2),

прямой 5′-GGGAAGAAATGACAAAAGAATTGAC-3′ (пр.3),

обратный 5′-AAGAAATAACGTCTGGGTGTGAATACG-3′ (пр.4).

Способ позволяет достоверно и точно определять пол ребенка на ранних сроках беременности в крови или моче женщины без использования инвазивных методов диагностики. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области диагностической медицины, а именно к разработке способов неинвазивного определения пола будущего ребенка.

Определение пола ребенка на ранних сроках беременности является важной проблемой в медицине из-за существования заболеваний, сцепленных с полом, таких как гемофилия А и В, различные формы умственной отсталости, сцепленные с Х хромосомой, например синдром Мартина-Белла, прогрессирующие мышечные дистрофии Дюшенна и Беккера и другие. Для определения пола будущего ребенка используют такие способы, как ультразвуковое исследование, анализ плодных клеток из амниотической жидкости, крови пуповины или биоптатов ворсин хориона. Однако эти способы невозможно осуществить на ранних сроках беременности из-за маленького размера эмбриона и высокого риска прерывания беременности.

Известен способ определения пола будущего ребенка методом ультразвуковой диагностики (1). Способ позволяет определять пол ребенка при сроке беременности от 25 недель. Недостатком известного способа является поздний срок определения пола ребенка.

Известен способ определения пола будущего ребенка методом исследования амниотической жидкости (2). Исследование амниотической жидкости проводят начиная с 7-й недели беременности. Для взятия амниотической жидкости иглу вводят в живот матери, минуя плод, берут образец амниотической оболочки, содержащий зародышевые клетки, и используют последний для культивирования плодных клеток, из которых готовят препарат для хромосомного анализа.

Недостатком известного способа является повреждение плодных оболочек, увеличивающее риск выкидыша, а также длительный процесс подготовки клеток для хромосомного анализа.

Известен способ определения пола будущего ребенка с использованием плодных клеток, выделенных из кровотока матери, с последующим хромосомным анализом, выполняемым при помощи флуоресцентно-меченых зондов, направленных на выявление клеток, содержащих Х и Y хромосомы (3).

Недостатками известного способа являются низкая точность (плодные клетки, содержащие Y хромосому, обнаруживаются в 41,1%), а также наличие ложноположительных результатов (11,1%).

Известен способ определения пола будущего ребенка, основанный на обнаружении последовательности Y хромосомы в амниотической жидкости методом ПЦР в реальном времени (4).

Недостатком известного способа является невозможность определения пола ребенка раньше, чем на пятнадцатой неделе беременности, а также высокий риск выкидыша зародыша.

Наиболее ближайшим к заявляемому способу — прототипом является способ определения пола будущего ребенка путем выявления Y специфической последовательности SRY в плазме крови беременных женщин в период с 10 по 20 неделю беременности методом ПЦР в реальном времени (5), включающий следующие стадии: разделение крови на фракцию клеток крови и плазму, выделение внеклеточной циркулирующей ДНК из плазмы с использованием коммерческого набора Qiagen и определение пола будущего ребенка (мальчика в случае присутствия SRY последовательности и девочки в случае отсутствия данной последовательности в выделенной внеклеточной ДНК) при помощи ПЦР-анализа в реальном времени.

Недостатком прототипа является низкая точность определения пола будущего ребенка (анализ циркулирующей ДНК, выделенной из плазмы крови женщин, вынашивающих плод мужского пола, позволял определить SRY последовательность лишь в 31% образцов).

Технической задачей изобретения является повышение точности и надежности способа, а также расширение его функциональных возможностей.

Поставленная техническая задача достигается предлагаемым способом, заключающимся в следующем:

у беременных женщин в период с 5 по 12 неделю беременности производят забор биологической жидкости — периферической крови или мочи, разделяют собранную жидкость на супернатант (плазму) и фракцию клеток (крови или мочи) при помощи центрифугирования. Далее из клеточной фракции элюируют внеклеточные дезоксирибонуклеиновые кислоты (внДНК), связанные с поверхностью клеток крови или мочи, выделяют внДНК из полученных элюатов и проводят выявление Y специфической последовательности DAZ с помощью ПЦР-анализа, используя систему праймеров, состоящую из двух прямых и двух обратных праймеров:

Прямой и обратный праймеры 1, 2 комплементарны элементу последовательности DAZ, повторенному 12 раз во внДНК плода, а праймеры 3, 4 комплементарны элементу последовательности DAZ, повторенному 8 раз. Таким образом, за один цикл ПЦР с каждой молекулы внДНК плода может образовываться до 20 копий ПЦР-продукта, что позволяет повысить точность выявления внДНК плода за счет увеличения количества ПЦР-продукта. Пары праймеров отличаются друг от друга не более, чем на 4 основания, а ПЦР-продукты, полученные с использованием праймеров 1, 2 и 3, 4, имеют одинаковую длину и последовательность, что позволяет использовать один и тот же флюоресцентно-меченный зонд для оценки результатов анализа методом ПЦР-анализа в реальном времени.

Продукты ПЦР, полученные при использовании подобранных праймеров (пр.1, пр.2, пр.3 и пр.4), анализируют с помощью электрофореза в 6% полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием.

Способ позволяет с большой точностью и надежностью определять пол будущего ребенка на ранних сроках беременности.

Определяющими отличительными признаками предлагаемого способа, по сравнению с прототипом, являются:

1. В качестве Y специфической последовательности выявляют последовательность DAZ, что позволяет повысить точность определения пола будущего ребенка, поскольку участки, подходящие для амплификации большинства членов семейств, состоящих из копий выбранного гена, многократно повторены в внДНК плода, а также проводить определение пола ребенка на ранних сроках беременности, когда наблюдается низкая концентрация плодной ДНК в крови и моче матери. В прототипе используют последовательность однокопийного гена SRY.

Известно выявление Y специфической последовательности DAZ для определения азооспермии или олигоспермии, так как обнаружение делеции в этой последовательности, по литературным данным, корелирует с этими заболеваниями (6), однако выявление Y специфической повторяющейся последовательности DAZ в внДНК плода для определения пола будущего ребенка (мальчик) в известных научно-технических и патентных источниках не обнаружено.

2. Для ПЦР-анализа используют специально подобранную систему праймеров (пр.1, пр.2, пр.3, пр.4), комплементарных к разным участкам повторяющейся последовательности DAZ, что позволяет повысить точность выявления детектируемых повторов DAZ за счет увеличения числа этих повторов во внДНК. В прототипе используют праймеры, позволяющие детектировать только одну копию последовательности гена SRY.

3. В качестве диагностического объекта используют внДНК, связанные с поверхностью клеток крови или мочи, что позволяет значительно повысить точность выявления специфических последовательностей DAZ в внДНК на ранних сроках беременности, когда основная масса внДНК связана с клеточной поверхностью эритроцитов и лейкоцитов, а в плазме находятся лишь незначительные ее количества. ВнДНК, связанные с поверхностью клеток крови, могут быть связаны с клеточной поверхностью в виде свободных внДНК, а также в составе комплексов с белками, липидами, липопротеинами, в виде рибонуклеопротеиновых комплексов, нуклеосом и апоптических телец (7, 8).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения способа.

У группы женщин (N=35), из отделения гинекологии роддома №15, имеющих беременность 5-12 недель, для обоснования возможности постановки на учет женщин с X и Y сцепленными наследственными заболеваниями, были взяты образцы крови с целью определения пола будущего ребенка.

Образцы крови разделяли на плазму и фракцию клеток крови при помощи центрифугирования в течение 20 мин при 400 g. Далее элюировали внДНК, связанные с поверхностью клеток крови в две стадии: сначала отмывали клетки добавлением 10 объемов ФБР, содержащего 5 мМ ЭДТА при 4°С, с последующим осаждением клеток центрифугированием и сбором супернатанта, а затем элюцию проводили равным объемом 0,25% раствора трипсина при 4°С, с последующим добавлением ингибитора фермента, осаждением клеток центрифугированием и сбором супернатанта.

ВнДНК выделяли из полученных элюатов, а также плазмы (для сравнения) методом сорбции на стекловолокнистом сорбенте (9). После начальной термической обработки ДНК в течение 5 минут при 95°С добавляли 1 ед. Taq ДНК полимеразы (СибЭнзим, Россия) и проводили 45 циклов полимеразной цепной реакции для амплификации специфического участка (Y специфической последовательности DAZ) плодной внДНК в следующем режиме: 30 секунд при 94°С, 15 секунд при 62°С, 30 секунд при 72°С; с использованием системы праймеров (пр.1, пр.2, пр.3 и пр.4):

О admin

x

Check Also

Когда можно беременеть после прививки краснухи и корь, ПензаМама — Семейный сайт Пензы

когда можно беременеть после прививки краснухи и корь? добрый вечер!девочки,сегодня сделала прививки корь и краснухи,сказали не беременеть полгода,а мы еще хотим ребеночка.

Когда и какие прививки делать ребенку? Нужно ли делать прививки детям?

Многие родители часто задают один и тот же вопрос: «Делать ли прививки ребёнку? Если делать, то какие и когда?». Постараюсь ответить на этот сложный вопрос.

Какие прививки сделать перед беременностью

Многие жители нашей страны сталкивались с ветряной оспой, или в просторечии ветрянкой, которой болеют преимущественно дети. В сознании людей прочно укоренилась мысль о том, что ветрянка представляет собой безобидную детскую инфекцию, которой лучше переболеть.

Третье УЗИ при беременности: сроки проведения, нормы и расшифровка

УЗИ в третьем триместре на 32–34-й неделе беременности Третье скрининговое УЗИ осуществляется на 32–34-й неделе беременности. В этот период развитие плода вступает в завершающую фазу, а организм матери начинает постепенно готовиться к рождению малыша.

Какие прививки нужно сделать, прежде чем забеременеть?

Какие прививки нужно сделать, прежде чем забеременеть? Что необходимо знать будущей маме об иммунизации. Если вы планируете забеременеть, неплохо бы проверить вашу историю иммунизации (связавшись с вашим постоянным доктором или даже с вашим педиатром) и отправить эту информацию вашему акушеру.

Какие прививки нужно сделать перед беременностью

Насколько совместимы прививка от столбняка и беременность Прививка от столбняка и беременность волнует многих будущих мам. Какие прививки при беременности должны быть поставлены заранее, а какие на первых месяцах — следует знать каждой девушке, планирующей завести ребенка.

Какие прививки во время беременности можно делать будущей маме

Прививки во время беременности. Какие прививки стоит делать? Какие прививки во время беременности можно делать будущей маме Для каждой будущей мамы забота о здоровье ребенка имеет огромное значение.

Вакцинация до беременности, прививки до беременности

Каждая будущая мама задумывается, надо ли ей сделать какие-то прививки, чтобы защититься от инфекций во время беременности. Этот вопрос, конечно, очень важен, и его желательно решить ещё при планировании беременности, т.к. нужно учитывать тот факт, что после вакцинации должно пройти определённое время до зачатия.

Беременность после прививки от кори

Риск от прививки во время беременности является скорее теоретическим. Польза вакцинации беременных женщин обычно превосходит потенциальный вред в тех случаях, когда: существует высокая вероятность заражения болезнью; инфекция представляет особую угрозу для матери или плода; вероятность причинения вреда вакциной мала.

Беременность и прививки

Вопрос вакцинации сегодня обсуждается достаточно бурно. У прививок есть свои поклонники и противники, поэтому мы решили рассмотреть эту тему как можно детальнее.

Влияние музыки на внутриутробное развитие ребенка

Влияние музыки на внутриутробное развитие ребенка – воздействие музыкальных произведений на будущего ребенка. Каждый молодой родитель может начать воспитание своего малыша еще до его рождения.

Влияние музыки на внутриутробное развитие детей

02.08.2013 , Беременность Комментарии 2 Может ли музыка повлиять на интеллектуальное развитие ребенка в утробе матери? И если да, то какому жанру, стилю и композиторам стоит отдать предпочтение? Что из этого может поспособствовать тому, что малыш будет более развит интеллектуально и творчески и более общителен? Эти вопросы, конечно, интересуют многих будущих родителей.

ЯПОНСКИЙ КАЛЕНДАРЬ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОЛА РЕБЕНКА , Таблица определения пола ребенка на год, Моя крошка и мир

Китайский календарь определения пола ребенка на 2016 год: таблица, калькулятор Японский календарь определения пола ребёнка – один из разнообразных способов узнать, кто в «домике» живёт – мальчик или девочка.

Японская таблица (календарь) определения пола ребенка

Японская таблица (календарь) определения пола ребенка Узнав об «интересном» положении, будущая мамочка, не дожидаясь планового УЗИ в 22 – 24 недели беременности, хочет заранее узнать, кто же у нее будет: мальчик или девочка.

Что делать паре, чтобы запланировать ребенка мужского пола

Многие пары, мечтающие о ребенке, имеют свое видение, мальчик или девочка гармоничнее влились бы в их семью. Кто-то мечтает заплетать косички, кто-то водить сына на рыбалку.

Чем отличаются японская и китайская таблицы определения пола ребёнка?

Таблицы определения пола будущего ребенка: японская и китайская Родителям свойственно желание знать пол будущего ребёнка. Факт беременности подтвердился, а кто же будет: мальчик или девочка? УЗИ делать рано, а узнать хочется.

ТестПол: реальные отзывы теста для определения пола ребенка

Определить пол ребенка на ранних сроках беременности самостоятельно не составит труда с Тестпол, отзывы на который оставили тысячи будущих мам из разных стран мира. Он представляет собой готовый набор, с помощью которого процедура диагностики займет не более 5 минут, без УЗИ и дорогостоящих процедур, быстро, безопасно и максимально точно.

Тест на определение пола ребенка: онлайн тест, гендерный

ЛЕКАРНА.ру Блог о здоровье и медицине. Советы для здорового образа жизни. Тест на определение пола ребенка: онлайн тест, гендерный Будущие родители всегда желают узнать, кто у них родится – мальчик или девочка.

Расшифровка узи 3 триместра, Триместры беременности

Расшифровка узи 3 триместра Статья защищена законом об авторских и смежных правах. При использовании и перепечатке материала активная ссылка на сайт обязательна! Таблицы расшифровки УЗИ в 1, 2 и 3 триместрах беременности УЗИ – это возможность узнать о состоянии здоровья ребенка, когда он находится в утробе матери.

Тест на определение пола ребенка, Ты

Какой самый достоверный тест на пол ребенка, задаются вопросом практически все будущие родители. Существует множество различных методик подсчетов, на основании которых ведется расчет определения пола ребенка.

Таблицы определения пола ребенка, восточный гороскоп определения пола ребенка

Традиция гласит, что на 7-й день нового года все люди в Китае становятся годом старше. А у нас у обоих отрицательный, интересно что выйдет. Идеи подарков на Алиэкспресс на 8 марта: фото, цена, каталог.

Таблицы определения пола ребенка по возрасту матери — Полезная таблица Мальчик или девочка, Мои будни

Существует 5 способов планирования пола ребенка. Японская таблица основана на том, что пол ребенка определяется месяцами рождения родителей и месяцем зачатия. 12. Беременная, ожидающая мальчика, ест больше той, у которой родится девочка.

Таблица определения пола ребенка: китайская стопроцентная таблица зачатия будущего ребенка, Ванги по возрасту

Таблицу определения пола ребенка можно легко найти в интернете Таблица определения пола ребенка – это современный и достаточно востребованный способ спланировать предстоящую беременность.

Таблица зачатия пола ребенка

Конечно же, в современном мире нет никаких предрассудков относительно пола рождаемого ребёнка, поэтому родители в любом случае будут очень рады появлению на свет нового члена своей семьи.

Стоит ли верить методам определения пола будущего ребенка?

Едва вы узнали, что беременны, и вот у вас уже масса планов, задумок, вопросов. И, чего уж тут лукавить, один из первых – кто же родится: мальчик или девочка? Причем не только впечатлительные будущие мамочки озадачиваются этой головоломкой, но и их мужья.

Способы определения пола ребенка

С приходом известия о скором пополнении семейства возникает большое количество приятных забот, таких как подбор имени, одежды, игрушек. Часто возникает желание перестроить жилище с учетом потребностей ребенка.

Самые точные формулы и методы для определения пола ребёнка

Самой большой интригой для мамы и папы всегда была дилемма: кто же у нас будет – дочка или сынок? К сожалению, никто не может гарантированно предугадать будущим родителям пол новорожденного.

Раннее определение пола ребёнка, Женский электронный журнал!

Ребёнок в семье это всегда радость, счастье и вообще дети это смысл жизни многих из нас. Не удивительно, что как только будущие родители узнают о том, что в семье появится ребёнок сразу же начинаются гадания, споры, пересуды на тему кто же это девочка или мальчик.

Почему китайский календарь зачатия для определения пола ребенка пользуется большой популярностью в странах азии?

Определение пола ребенка по китайскому календарю зачатия Многие молодые пары мечтают о рождении исключительно мальчика либо девочки. Зачастую приходится прибегать к народным методам, среди которых можно особо отметить китайский календарь определения пола ребенка.

Популярные способы определения пола будущего ребенка

Популярные способы определения пола будущего ребенка Современные технологии позволяют молодым родителям узнать пол будущего малыша уже во втором триместре беременности.

Планирование пола ребенка: существующие способы программирования пола младенца

Реальные методы планирования желанного пола ребенка Реально ли планирование пола ребенка и какие популярные методы существуют мы и попробуем с вами разобраться. Для большинства будущих мам и пап пол ребенка не принципиален, главное, чтобы малыш родился здоровым и крепеньким, а будет это мальчик или девочка решит природа, вердикт которой будет окончательным и бесповоротным.

Планирование пола ребенка, О беремености, Медицина и здоровье

Во все времена люди пытались оказать влияние на природу и родить ребенка определенного пола, чаще всего мальчика. Попытки эти в пятидесяти процентах случаев оказывались «успешными». Позже было доказано, что это и есть естественное распределение полов.

Планирование пола ребенка по таблице Ванги: насколько верен расчет?

Планирование пола ребенка по таблице Ванги: насколько точен метод ? Автор: Юлия Зоркальцева 2017-02-03 в 12:45 Привет читателям блога! Когда есть желание завести маленького карапуза, вопрос "кого именно ? " возникает автоматически.

Особенности планирования и формирования пола будущего ребенка

Определение пола будущего ребенка: методы и генетика Пол будущего малыша волнует практически всех родителей. Данный вопрос необыкновенно актуален для тех супругов, у которых уже имеются дети одного пола.

Определение пола ребенка: мальчик или девочка

Многие будущие родители еще до рождения стремятся узнать, кто у них родится – мальчик или девочка. Несмотря на достижения в современной медицине, существуют и народные способы, как определить пол малыша.

Рейтинг@Mail.ru